Metabolische Phänotypen
Metabolische Phänotypen: Phenotype MicroArray System
Hersteller: Biolog Inc.
- Analyse von bis zu tausend verschiedenen zellulären Phänotypen in einem kostengünstigen Experiment
- Einsatz vorgefertigten 96-Well Mikrotiterplatten die mit verschiedenen Substraten, Kationen, Anionen, Hormonen, Interleukinen oder Chemotherapeutika beschichtet sind
- Analyse mit einem Redox-Farbstoff (Formazan-Derivat)
- Für alle Säugetierzellen geeignet
- Leistungsstarke Technologie für vergleichende Genotypische-Phänotypische Analysen
- Charakterisierung von Zellmetabolismen und deren Regulation
- Interaktion von Wirkstoffen, Umwelteinflüssen und hormonellen Signalen auf den Metabolismus in lebenden Zellen
- Optimierung von Zellkulturbedingungen. Analyse von optimalen Substraten, Wachstumsfaktoren, Hormonen…
- Vergleich der Chemosensitivität verschiedener Zellen (z.B. Tumorzellen…)
- Erstellung von charakteristischen Fingerabdrücken
- Identifikation von Zellen Endpunktanalysen (in 96-Well Mikrotiterplatten) oder Kinetikmessung (in 96-Well Mikrotiterplatten mit OmniLog Instrument) möglich
- Einfache Anwendung
- Einsetzbar in Forschung, Bioprozessoptimierung und Qualitätssicherung
- High throughput Anwendung mit OmniLog PM-Instrument
Jede Zelle hat Ihren eigenen metabolischen Fingerabdruck. Dieser Fingerabdruck kann genutzt werden um z.B. die Stabilität der Zellen zu überprüfen, die Produktivität von Zelllinien zu verbessern oder genetische Veränderungen oder Substanztestungen zu analysieren. Mit dem Phenotype MicroArray System (PMM System) werden erstmals in vitro bis zu 1000 verschiedene zelluläre Phänotypen gleichzeitig, schnell und standardisiert untersucht. Aus diesen Daten kann dann ein umfassender, metabolischer Fingerabdruck erstellt werden.
Durch die Phenotype MicroArray Technologie werden physiologische Reaktionen der Zelle auf verschiedene Kulturbedingungen untersucht. Dazu werden vom Hersteller, in einzelnen Wells einer 96-Well Mikrotiterplatten verschiedene Substrate wie Kohlenstoff- und Stickstollquellen, Hormone, Ionen, Anionen oder Zytotoxische Wirkstoffe vorgelegt. Anschließend werden die zu untersuchenden Zellen in diesen Mikrotiterplatten kultiviert. Durch die Verwendung eines sehr sensitiven Redox-Farbstoffes können unterschiedliche Zell-Phänotypen kolorimetrisch analysiert werden. Wird z.B. eine Kohlenstoffquelle von einer Zelle gut verstoffwechselt dann atmet die Zelle sehr stark (hohe Mitochondrien Aktivität) und viel Farbstoff wird reduziert und ein starker Farbumschlag erfolgt (violette Färbung). Wird eine andere Kohlenstoffquelle weniger gut verstoffwechselt dann atmet die Zelle weniger (geringere Mitochondrien Aktivität), weniger Farbstoff wird reduziert und der Farbumschlag ist schwächer.
Die Inkubation der Mikrotiterplatten kann in einem üblichen Zellinkubator erfolgen, oder in dem speziell entwickelten OmniLog Instrument mit dazugehöriger Software. Mit dem OmniLog Instrument können bis zu 50 Mikrotiterplatten parallel analysieren werden. Es erfasst alle 15min ein digitales Bild von den Platten und kann somit 450.000 Datenpunkte pro Tag erstellen. Die gespeicherten Daten werden als kinetische Kurve dargestellt werden. Um zwei Zelllinien miteinander zu vergleichen kann der kinetische Verlauf der einen Zelllinie in grün und der der anderen in rot dargestellt werden. Die spezielle OmniLog Software erstellt ein Overlay. Identische Bereiche erscheinen gelb, Unterschiede werden grün oder rot dargestellt.
Anwendungsbereiche in Forschung, Bioprozessen oder der Qualitätssicherung
- Optimierung von Zellkulturbedingungen, Medienoptimierung
- Zellcharakterisierung und –Identifizierung
- Dokumentation der Stabilität und der Kreuzkontaminationen von Zellen
- Identifizierung von Genfunktionen Klassifizierung von Wirkstoffen
- Analyse chemischer Einflüsse
- Sensitivität gegenüber Chemotherapeutika
- Steigerung der Produktionsausbeute (z.B. Antikörper, biologischen Präparate)
- Erstellen von Fingerprints mit mehreren Parametern
PM-M1 – PM-M4 → Stoffwechselaktivitätstests Platten beschichtet z.B. mit Kohlenstoff- und Stickstoffquellen (z.B. Glukose, Adenosin, Tagatose…)
PM-M5 – PM-M8 → Stoffwechselaktivitätstests Platten beschichtet z.B. Ionen, Hormonen und weiteren Stoffwechseleffektoren
PM-M11 – PM-M14 → Chemosensitivitätstests Platten beschichtet mit verschiedenen anti-karzinogenen Reagenzien (zytotoxische Wirkstoffe)
OmniLog Instrument
- automatischer Inkubator und Auslesegerät für 50 Mikrotiterplatten
- Aufnahme der Farbänderung alle 15 min - Assay cv’s <10%
- Bedienung durch OmniLog PM Software
OmniLog PM Software
- Anwendung in Verbindung mit OmniLog System und Phenotype MicroArray Platten
- Steuerung der OmniLog Aktivitäten
- Anzeige und Vergleich der kinetischen Daten
- Alle Daten können für statistische Analysen exportiert werden
- Direkte Verbindung zu KEGG
Produktinfo
Ihre Ansprechpartnerin
Dr. Astrid Alef
(Leiterin Biotechnologie)
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